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| 22/08/2009 | 20:00 | CD San Roque | - | UD Melilla | 1:2 | |
| 25/08/2009 | 19:00 | Villajoyosa CF | - | UD Logroñés | 2:0 | |
| 26/08/2009 | 18:30 | CD Lagun Onak | - | CD Izarra | 2:1 | |
| 19:00 | SD Lemona | - | CD Leonesa | 2:4 pso | ||
| 19:30 | CD Alavés | - | CF Palencia | 1:4 pso | ||
| 19:30 | SD Compostela | - | Zamora CF | 1:2 | ||
| 19:30 | SD Ponferradina | - | SD Eibar | 5:4 pso | ||
| 19:30 | RSD Alcalá | - | Real Oviedo | 0:1 | ||
| 19:30 | UDA Gramenet | - | UE Sant Andreu | 0:3 | ||
| 19:45 | CE Sabadell | - | Atlético Monzón | 2:0 | ||
| 20:00 | UB Conquense | - | CD Toledo | 1:0 | ||
| 20:00 | Unión Deportiva Puertollano | - | Gimnástica Torrelavega | 3:1 | ||
| 20:00 | Alicante CF | - | CF Sporting Mahonés | 5:4 pso | ||
| 20:00 | Real Jaén | - | Unión Estepona | 0:1 | ||
| 20:00 | UD Marbella | - | Caravaca Club de Fútbol | 1:0 | ||
| 20:00 | CD Leganés | - | CF Reus Deportiu | 1:3 | ||
| 20:30 | SD Tenisca | - | Cerro Reyes | 2:4 | ||
| 27/08/2009 | 20:00 | Lorca Deportiva | - | AD Ceuta | 1:2 |
