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| 08/09/2021 | 19:30 | Piacenza Calcio | - | Mantova 1911 SSD | 2:1 (0:1) | |
| 14/09/2021 | 19:00 | Calcio Padova | - | FC Legnago Salus | 1:0 (1:0) | |
| 15/09/2021 | 14:00 | Modena FC | - | Imolese Calcio | 4:0 (2:0) | |
| 14:00 | Palermo FC | - | SS Monopoli 1966 | 2:1 (2:0) | ||
| 15:30 | FC Südtirol | - | Giana Erminio | 4:1 (1:1) | ||
| 15:30 | Juventus II | - | FeralpiSalò | 3:2 (1:1) | ||
| 16:00 | US Avellino | - | Ancona 1905 | 0:1 (0:1) | ||
| 16:30 | US Catanzaro | - | Calcio Catania | 1:0 (0:0) | ||
| 16:30 | Fidelis Andria | - | Virtus Francavilla | 2:1 (0:0, 1:1) aet | ||
| 16:30 | Foggia Calcio | - | ACR Messina | 2:0 (2:0) | ||
| 17:00 | Viterbese | - | FC Turris | 3:1 (2:0) | ||
| 17:30 | Trento Calcio 1921 | - | Seregno | 3:1 (0:0, 0:0, 0:0) pso | ||
| 19:00 | Pro Vercelli | - | UC AlbinoLeffe | 2:4 (1:1, 2:2, 2:2) pso | ||
| 19:30 | Cesena FC | - | Virtus Entella | 1:2 (0:0) | ||
| 19:30 | Delfino Pescara | - | US Grosseto FC | 2:0 (1:0) | ||
| 16/09/2021 | 14:00 | Teramo Calcio | - | ACN Siena 1904 | 1:0 (0:0) |
